Tutkimusohjekirjan etusivu. Hakemisto erikoisalan, nimen, lyhenteen tai tutkimusnumeron mukaan
| 11686 | Bm-Kimera |
Puh. 313 1908
lääkäri Veli Kairisto: veli.kairisto
tyks.fi / (02) 313 2899 / 52899, sairaalageneetikko Vesa Juvonen: vesa.juvonen
tyks.fi / (02) 313 1908 / 51908 ja sairaalageneetikko Tuija Lundán: tuija.lundan
tyks.fi / 02-3133897 / 53897
Lähete molekyyligen.tutkimukseen
Kantasolujensiirron saajan perustutkimus kimerismiseurantaa varten sekä siirron jälkeisen kimerismin seuranta.
4 ml CPT-putki (tai 10 ml EDTA)
Sitraattiruiskulla n. 3 ml luuydintä CPT-putkeen (suositeltava putkityyppi: BD Vacutainer CPT with Sodium Citrate, 4 mL draw capacity). Sentrifugointi (30 min, 1600 g, huoneenlämpö 18-25C) kahden tunnin sisällä näytteenotosta. Sentrifugoinnin jälkeen käännetään avaamaton putki 5-10 kertaa ylösalaisin.
Lähete molekyyligeneettiseen tutkimukseen: http://ohjekirja.tykslab.fi/liitteet/molgen.pdf
PCR. Kapillaarielektroforeesi.
Tarvittaessa
Kimerismiä tutkimalla voidaan selvittää kantasolusiirteen tarttumista tai rejekoitumista. Kantasolujen siirrossa pyritään täydelliseen luovuttajan kimerismiin. Jos kaikki solut ovat peräisin potilaalta, kyseessä on saajan kimerismi, ja jos solut ovat luovuttajaperäisiä, puhutaan luovuttajan kimerismistä. Sekakimerismissä osa soluista on potilaalta ja osa luovuttajalta.
Ennen kantasolujensiirtoa otetusta saajan veri- tai luuydinnäytteestä sekä luovuttajan verinäytteestä PCR-monistetaan seitsemän tetranukleotidipolymorfista mikrosatelliittimarkkeria, jotka kokoerotellaan kapillaarielektroforeettisesti. Kimerismiseurantaan valitaan ne markkerit, joiden alleelikombinaatio poikkeaa saajan ja luovuttajan näytteissä.
Luuydinnäytteestä seurantatutkimus tehdään CD34-vasta-aineella eristettyjen solujen DNA:sta. Näytteistä analysoidaan esitutkimuksen perusteella valitut markkerit ja kvantitoidaan havaittujen alleelien suhteelliset osuudet, joista kimerismiaste lasketaan. Siirron jälkeisissä seurantanäytteissä sekakimerismi saadaan PCR-menetelmällä esiin 1 - 5 %:n herkkyydellä.
Tutkimuksesta annetaan lausunto.
Päivitetty 26.03.2012 / TKL