TYKSLAB

Tutkimusohjekirjan etusivu. Hakemisto erikoisalan, nimen, lyhenteen tai tutkimusnumeron mukaan

Kimerismitutkimus, luuytimestä

11686 Bm-Kimera

Tiedustelut

Puh. 313 1908

Asiantuntijat

lääkäri Veli Kairisto: veli.kairistoattyks.fi / (02) 313 2899 / 52899, sairaalageneetikko Vesa Juvonen: vesa.juvonenattyks.fi / (02) 313 1908 / 51908 ja sairaalageneetikko Tuija Lundán: tuija.lundanattyks.fi / 02-3133897 / 53897

Lähete

Lähete molekyyligen.tutkimukseen

Indikaatiot

Kantasolujensiirron saajan perustutkimus kimerismiseurantaa varten sekä siirron jälkeisen kimerismin seuranta.

Näyteastia

4 ml CPT-putki (tai 10 ml EDTA)

Näyte

Sitraattiruiskulla n. 3 ml luuydintä CPT-putkeen (suositeltava putkityyppi: BD Vacutainer CPT with Sodium Citrate, 4 mL draw capacity). Sentrifugointi (30 min, 1600 g, huoneenlämpö 18-25C) kahden tunnin sisällä näytteenotosta. Sentrifugoinnin jälkeen käännetään avaamaton putki 5-10 kertaa ylösalaisin.

Lähete molekyyligeneettiseen tutkimukseen: http://ohjekirja.tykslab.fi/liitteet/molgen.pdf

Menetelmä

PCR. Kapillaarielektroforeesi.

Tekotiheys

Tarvittaessa

Yleistä

Kimerismiä tutkimalla voidaan selvittää kantasolusiirteen tarttumista tai rejekoitumista. Kantasolujen siirrossa pyritään täydelliseen luovuttajan kimerismiin. Jos kaikki solut ovat peräisin potilaalta, kyseessä on saajan kimerismi, ja jos solut ovat luovuttajaperäisiä, puhutaan luovuttajan kimerismistä. Sekakimerismissä osa soluista on potilaalta ja osa luovuttajalta.

Ennen kantasolujensiirtoa otetusta saajan veri- tai luuydinnäytteestä sekä luovuttajan verinäytteestä PCR-monistetaan seitsemän tetranukleotidipolymorfista mikrosatelliittimarkkeria, jotka kokoerotellaan kapillaarielektroforeettisesti. Kimerismiseurantaan valitaan ne markkerit, joiden alleelikombinaatio poikkeaa saajan ja luovuttajan näytteissä.

Luuydinnäytteestä seurantatutkimus tehdään CD34-vasta-aineella eristettyjen solujen DNA:sta. Näytteistä analysoidaan esitutkimuksen perusteella valitut markkerit ja kvantitoidaan havaittujen alleelien suhteelliset osuudet, joista kimerismiaste lasketaan. Siirron jälkeisissä seurantanäytteissä sekakimerismi saadaan PCR-menetelmällä esiin 1 - 5 %:n herkkyydellä.

Tulkinta

Tutkimuksesta annetaan lausunto.

Päivitetty 26.03.2012 / TKL

Sivun alkuun